Дата публикации: 2020

Дата публикации в реестре: 2020-08-03T12:17:55Z

Аннотация:

Данная работа написана на тему "Антигерпетическая активность эхинамина В, выделенного из пигментов морского ежа Scaphechinus mirabilis". Основной текст изложен на 60 страницах, содержит 1 таблицу, 20 рисунков, 59 библиографий. Объект и предмет исследования. В работе использовали штамм L2 вируса простого герпеса 1 типа. Исследования проводили на чувствительной к ВПГ-1 перевиваемой культуре клеток Vero (эпителиальные клетки почек африканской зеленой мартышки Chlorocebus aethiops). Исследуемым соединением являлся Эхинамин В (2-амино-7-этил-3,5,6,8-тетрагидрокси-1,4-нафтохинон), выделеный из морского ежа Scaphechinus mirabilis. Целью работы явилось изучение in vitro антигерпетической активности эхинамина В, выделенного из морского ежа Scaphechinus mirabilis. Задачи: 1. Исследовать динамику репродукции ВПГ-1 в культуре клеток Vero. 2. Изучить цитотоксичность эхинамина В и Ацикловира® на культуре клеток Vero. 3. Установить влияние эхинамина В на разные стадии жизненного цикла ВПГ-1. 4. Дать сравнительную оценку эффективности эхинамина В и Ацикловира® на клеточной модели инфекции, вызванной вирусом ВПГ-1. Методы и средства анализа. Цитотоксичность соединений оценивали с учетом жизнеспособности клеток Vero, обработанных различными концентрациями исследуемых соединений, с помощью МТТ (метилтиазолилтетразолий бромид) теста. В настоящей работе определение накопления ВПГ-1 проводили с использованием метода бляшкообразования и МТТ-теста. Степень подавления цитопатогенного действия (ЦПД) ВПГ-1 исследуемыми соединениями оценивалась как визуально с помощью инвертированного микроскопа (Eclipse TS 100, Nikon, Япония), так и с использованием МТТ-теста. Статистическую обработку данных проводили, используя пакет программ Statistica 10.0. Результаты исследования. На модели перевиваемой культуры клеток Vero исследован механизм развития инфекционного процесса, вызванного ВПГ-1. Определены инфицирующая доза вируса (100 БОЕ/мл) и сроки максимальной репродукции вируса в клетках (72 часа) для оптимального варианта развития ВПГ-1 инфекции. Установлены 50% цитотоксические и максимально нетоксические концентрации эхинамина В и Ацикловира® для клеток Vero. Показано, что при длительной экспозиции (72 часа) эхинамина В с клетками его CC50 ˃100 мкг/мл. Исследовано влияние эхинамина В и Ацикловира® на разные стадии жизненного цикла ВПГ-1: при предварительной обработке клеток перед инфицированием (профилактическое действие); при непосредственном воздействии на вирус (вирулицидное действие); на стадию адсорбции и проникновения вируса в клетки (одновременное действие соединений и вируса); после проникновения вируса в клетки (вирусингибирующее действие). Установлено, что основными механизмами антигерпетической активности эхинамина В in vitro является прямая инактивация вирусных частиц (вирулицидное действие) и ингибирование адсорбции и проникновения вируса в клетки. Показано, что Ацикловир® в отличие от эхинамина В не проявлял вирулицидную активность по отношению к ВПГ-1. Комбинированное применение эхинамина В и Ацикловира®, как соединений с разными механизмами противовирусного действия, определяет перспективность их дальнейшего изучения и возможного использования при герпесвирусных инфекциях. Рекомендации. Результаты исследований противовирусного действия эхинамина В на культуре клеток Vero говорят о целесообразности дальнейшего изучения этого соединения на модели in vivo. Вместе с тем, необходимо отметить, что, поскольку Ацикловир®, широко используемый при лечении герпесвирусных инфекций, не оказывал прямого воздействия на ВПГ-1, то комбинированное применение этого официального препарата с эхинамином В является перспективным направлением.

Тип: дипломная работа (проект) специалиста