Разработка иммунохроматографической тест-системы с нанозимным усилением для выявления фитопатогена Erwinia amylovora

РАЗО Ш.; ПАНФЁРОВ В.Г.; САФЕНКОВА И.В.; ДРЕНОВА Н.В.; ВАРИЦЕВ Ю.А.; ЖЕРДЕВ А.В.; ПАКИНА Е.Н.; ДЗАНТИЕВ Б.Б.

Исследования проводили с целью разработки высокочувствительной иммунохроматографической тест-системы для выявления возбудителя бактериального ожога Erwinia amylovora, c использованием Pt-содержащего нанозима как усилителя оптического сигнала. Тест-система включала антитела, специфичные к E. amylovora, иммобилизованные в тестовой зоне нитроцеллюлозной мембраны и на поверхности наноразмерной метки. В качестве метки синтезировали нанозимы, состоящие из Au-содержащего ядра и Pt-содержащей оболочки. Для Au-Pt наночастиц и их конъюгатов с антителами была показана каталитическая (пероксидазо-подобная) активность, развивающаяся в течение 1.2 мин и обеспечивающая усиление сигнала на тест-полоске. При проведении анализа тест-полоску погружали в пробу, затем на нитроцеллюлозную мембрану наносили хромогенный субстрат на основе 3,3'-диаминобензидина, окисляемый нанозимом. В результате при наличии E. amylovora в пробе тестовая и контрольная зоны были окрашены в черный цвет. При отсутствии E. amylovora в пробе (буфер или растительный экстракт здорового растения -отрицательный контроль) окрашена была только контрольная зона. Предел обнаружения E. amylovora составил 5х10³ КОЕ мл^-1, что в 10 раз ниже, по сравнению с тестированием без нанозимного усиления. Время анализа - 15 минут. Экстракты листьев яблони, инфицированные бактериальным ожогом согласно результатам ПЦР, тестировали с использованием разработанной тест-системы. По результатам иммунохроматографического анализа при усилении сигнала E. amylovora также была выявлена во всех пробах. Разработанная иммунохроматографическая тест-система на основе каталитических свойств наночастиц Au-Pt обеспечивает высокочувствительную детекцию E. amylovora и, благодаря простоте применения, может использоваться в полевых условиях.

Разработка иммунохроматографической тест-системы с нанозимным усилением для выявления фитопатогена Erwinia amylovora

Связанные документы (рекомендация CORE)

Новости проекта

Новости

Партнеры

Индексация